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烧烫伤动物模型构建方法

烧烫伤是生活中常见的皮肤损伤,一般指由于接触火源、开水、热油等高热物质而发生的一种急性皮肤损伤。在日常生活中烧烫伤主要是因热水、热汤、热油、热粥、炉火、电熨斗、蒸汽等造成。烧烫伤动物模型是烧伤外科领域基础与应用研究中极为重要的一个实验方法和手段,那么常用到的动物烧烫伤模型是如何建立的呢?我们一起来了解下吧

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常见的烧烫伤模型


1、动物选择
目前用于造烧烫伤研究的动物有狗、猪、兔、大鼠、小鼠和豚鼠等。由于小型猪的皮肤组织结构、血液学与生化指标等与人接近,较为理想,但价格昂贵。实验中常用的是家兔和大鼠、小鼠;若实验过程涉及到放射、烧()复合实验,则可以选择狗、大鼠和小鼠,不选家兔,因为家兔在照射后常引起休克而死亡


2、烫伤模型的建立方法
火焰烧伤法
动物选择:大鼠、家兔、小型猪、犬
原理:利用可燃物质(如凝固汽油、磷粉、闪光粉等)在动物局部皮肤上直接烧灼一定时间,制备动物烧烫伤模型。
具体方法:
凝固汽油法—先将动物造模区脱毛,脱毛局部无损伤。按0.1mL/cm-2均匀涂布3%的凝固汽油,点火燃烧不同时间,制成不同程度的烧伤(用干净湿布压灭)。
磷烧伤法—将磷粉末均匀涂抹在大鼠欲烧区,用电吹风热风点燃磷末并助燃,待磷燃尽即可,即可造成实验动物不同程度的烫伤。
闪光粉法取硝酸钾20.25g,硝酸钼60.75g,镁粉28.5g,铝粉40.5g充分混合,配制成闪光粉。将准备好的实验动物脱毛麻醉,画出待烧伤的面积,未烧伤的区域用石棉保护。将闪光粉均匀放在一块白色铁板上,用一根保险丝埋在闪光粉内,备模区域对着闪光粉,动物背与闪光粉之间距离为46~52cm,通电闪光粉燃烧使动物备皮区皮肤烧伤


高温烫伤法
动物选择:大鼠、小鼠、家兔、犬、豚鼠
原理:在实验动物身上或者距实验动物一定距离处放置热源,利用动物局部皮肤直接或间接接触高温源一定时间,制备动物烧烫伤模型。
具体方法:
直接烫伤法—将动物造模区脱毛麻醉,脱毛局部无损伤。使用恒温水浴锅,将待烫区域浸入水浴中不同时间制成不同程度的烧伤。
恒温恒压电热烫伤仪—将动物造模区脱毛麻醉,脱毛局部无损伤。取动物俯卧位,四肢分别固定在手术台两侧。使用温恒压电热烫伤仪进行造模
电光源烧伤法—通过照射产生烧伤,常用致伤热源有溴钨灯、电炉等。用2kW溴钨灯的焦点热源对准动物的待烧伤区,周围用隔热材料(如石棉)遮盖进行致伤实验


化学烧灼法
动物选择:家兔
原理:利用化学物质如不同浓度的强酸或强碱直接烧灼动物局部皮肤一定时间,制备动物烧烫伤模型。
具体方法:
先将家兔造模区脱毛,脱毛局部无损伤。用6 mol/L-1HCl或2.5 mol/L-1NaOH浸泡过的3层纱布块(直径2 cm)分别紧贴于家兔拟烧伤区不同时间除去纱布后立即擦干皮肤表面残留的HCl或NaOH,5分钟后用生理盐水仔细冲洗创面并擦干,制备烧烫伤伤口。


电烧伤法
动物选择:家兔
原理:用高压电对实验动物进行电击的方法对动物表皮进行烫伤,制备动物烧烫伤模型。
具体方法:
将家兔一侧小腿和臀部剃毛,麻醉后家兔取俯卧位,四肢分别固定在手术台两侧。在腿和臀部剃毛部位各置1.5 cm×3 cm铅电板,用导线将2个电极连接于2 A熔丝及双联闸刀开关,接22 0V电源。以合闸时间长短,造成下肢和臀部不同程度电烧伤


3、观测指标
外观检查
一度烫伤:烫伤只损伤皮肤表层,局部轻度红肿,无水疱,疼痛明显;
二度烫伤:烫伤导致真皮损伤,局部红肿疼痛,有大小不等的水疱;
三度烫伤:烫伤导致皮下脂肪、肌肉、骨骼都有损伤,并呈灰或红褐色。

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病理检查
一度烫伤:损伤表皮层角质层、透明层和颗粒层,有时会伤及棘状层,但生发层健在;
二度烫伤:浅II-表皮全层及真皮浅层受损;深II度:真皮深层受损,仅残留深部的皮肤附件;
三度烫伤:皮肤全层及皮下组织受损,皮肤附件也完全破坏,严重者可伤及肌肉甚至骨骼。


生化指标
生化指标是机体对烧烫伤的生理反应,是烧烫伤发生、发展及康复过程中的间接相关指标。如模型建立后生化指标升高,表明模型制备成功。烧烫伤相关的生化指标有炎症因子、生长因子[如白细胞介素-6(IL-6)IL-8,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)IL-1β等。


实验条件不同,选择的方法也是不同的。在这里我们只是对造模方法进行了总结,具体步骤及操作还是需要查文献哟另外,请在允许的范围内友善对待为科学献身的小动物们!

参考文献
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[3]苗明三等,烧(烫)伤动物模型制备规范(草案)[J]. 中国实验方剂学杂志,2017(24):11-16.
[4]王宫等,不同深度皮肤烫伤的动物模型建立[J]. 福建中医药大学学报,2013(5):2.
[5]彭旦明等,烧(烫)伤动物模型的建立及评价[J].辽宁中医杂志,2011,38(9):1712-1713


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