细胞污染带来的危害远不止实验室的恐慌和老板的暴怒,最坏的结果是引起实验的失败和数据的错误,让你的研究走向错误的方向:
2014 年在《Nature》杂志刊登的一篇文章中,研究者 John Hogenesch 进行了广泛的样本分析。发现包括 Cell、Nature 在内的顶级期刊中都有着支原体存在水平较高的研究项目的成果。如果超过十分之一的细胞被污染的话,重复实验和更换细胞所花费的时间和资源将会导致数亿美元的损失[1]。
细胞与细胞间的污染问题更为可怕,根据美国科罗拉多大遗传学家 Korch 的研究,78 个被广泛使用的细胞系最终经证实长满了其他细胞。而仅仅两株存在严重污染的「明星」细胞系,就涉及 1,400+ 种杂志上的 7,000+ 篇文章,这 7,000 篇论文又被其他论文引用 214,000 次,总共造成的经济损失达超过 40+ 亿美元。这种实验材料的不纯净,造成后续实验结果的不可靠,将会对基础科学的发展造成不可估量的影响[2]。
无孔不入的污染让人防不胜防,这些细微又容易忽略污染源你都注意到了吗?
1. 实验室环境设备
二氧化碳培养箱在培养细胞取出和放入的过程中未经消毒酒精擦拭; 设备清洁消毒不彻底,存在死角; 设备出现问题,但未能及时发现; 洁净室清扫消毒不到位; 环境监测缺失,异常环境参数不能及时发现。
2. 人员及操作
未建立或未严格执行标准操作流程;
实验进行时人员频繁进出,无专用实验服和拖鞋;
个人卫生及习惯不佳,实验操作不熟练,缺乏条理;
未进行定期细胞监测,包括培养液、细胞形态、细胞生长状态等。
3. 细胞培养试剂
血清在生产时已被支原体或病毒污染,或存在化学污染;
试剂配置时,试剂质量不达标或玻璃器皿未严格消毒。
4. 细胞
交瘤细胞中需特别注意逆转录病毒污染;
供应的原种出现污染,细胞源头质控问题;
培养两种以上细胞时,操作不规范,可能导致细胞交叉污染。