每当拿到一个质粒图谱，第一反应就是一脸懵，这是什么玩意？这些ori、RBS、tet是什么鬼？这些箭头代表什么，转录的方向吗？为什么都不相同，不会“撞车”么？这玩意究竟怎么看啊？
看懂质粒图谱的4个要点↓↓
复制起点，它控制着质粒的复制，并决定了质粒的宿主和拷贝数。
筛选标记，了解筛选标记类型，方便后续确定筛选重组质粒载体的方法。
多克隆位点，既外源基因的插入位点。
其他元件，如转录调控元件、翻译表达元件和蛋白标签等。
第1步 了解质粒图谱中的复制起点
图谱中的ori表示质粒的复制起点。质粒的复制起点决定了质粒的宿主及质粒的拷贝数相关，它是质粒中的一段特定序列，富含AT和重复序列。
Tips：
图谱上只有一个ori，表示质粒是原核克隆及表达质粒
图谱上有两个ori，则表示该质粒是穿梭质粒，既可以在原核也可以在真核中复制
第2步 了解质粒图谱中的筛选标记
图谱中的AmpR、KanaR等表示质粒载体中的筛选标签，多为抗生素抗性基因，方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。特点是单词最后会以大写R或上标r结束。
Tips：
只在一种宿主中复制的质粒仅具有一种抗性筛选标记，如原核克隆载体和原核表达载体
能够在两种类型宿主中复制和表达的载体会具有两种筛选标记，如穿梭质粒
第3步 了解质粒图谱中的多克隆位点
图谱中的MCS或者许多内切酶排排坐的部分，就是质粒的多克隆位点。多克隆位点为一系列限制性内切酶酶切位点，是外源DNA的插入位点，一般可通过酶切/连接的方式将外源DNA插入质粒。
Tips：
位于转录启动和转录终止信号之间
所包含的限制性内切酶位点数量和组成因载体不同会有所差异
其中的酶切位点在质粒中为单一的酶切位点
使用时需注意质粒载体与外源DNA酶切位点的兼容性问题
第4步 看看质粒图谱中还有哪些有用的信息
质粒载体中除复制起始位点、筛选标记、多克隆位点外，还具有其他一些表达或调控元件，如转录调控元件、翻译调控元件和融合表达标签蛋白等。
蛋白纯化标签蛋白：His-Tag，GST-tag等
蛋白检测标签蛋白：Myc-Tag，Flag-Tag，HA-Taq等
荧光蛋白表达标签：GFP，mCherry等
