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支原体污染及检测注意事项

      支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。 支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,最小直径0.2um,可通过滤器。

 
       某研究中心通过对国内100余株/系细胞的检测,污染率达30%~60%,形势不容乐观,从国外引进细胞株/系也经常出现支原体的污染。 支原体在污染细胞后,它通过影响细胞的DNA、RNA的合成及急速消耗培养基中的氨基酸来抑制细胞的生长,并能降低细胞的融合率。     
        因此,在运用各种细胞系进行实验研究时,首先要证明所用细胞有无支原体的污染。 
目前常用的支原体检测的方法有以下几种:
 
(a)相差显微镜观察;
(b)低张处理地衣红染色法;
(c)荧光染色法;
(d)酶标法;
(e)PCR法。


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