氨苄青霉素
组分浓度:100mg/ml 氨苄青霉素
配制量:50ml
配制方法:
称取5g Ampicillin置于50ml塑料离心管中。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。
0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
卡那霉素
组分浓度:50mg/ml卡那霉素
配制量: 50ml
配制方法:
称取2.5g 卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。
0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
RNase A
组分浓度:10mg/ml RNase A
配制量:50ml
配制方法:
取0.5g RNase A置于50ml塑料离心管中。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。
100℃煮沸15min,缓慢冷却至室温,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
IPTG
组分浓度:24mg/ml IPTG
配制量:50ml
配制方法:
称取1.2g IPTG置于50ml塑料离心管中。
加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。
用0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
X-Gal
组分浓度:20mg/ml X-Gal
配制量:50ml
配制方法:
称取1g X-Gal置于50ml塑料离心管中。
加入40mlDMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解之后定容至50ml。
小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
DTT
组分浓度:1M DTT
配制量:10ml
配制方法:
称取1.54g DTT置于15ml塑料离心管中。
加入8ml的10mM NaAc(pH5.2),充分混合溶解之后定容至10ml。
用0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。
EDTA溶液
组分浓度:0.5M EDTA
配制量:1L
配制方法:
称取186.1g Na2EDTA·2H2O置于1L烧杯中。
加入800ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。
用NaOH调节调节pH值至8.0(约20gNaOH),当pH接近8.0时, EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。
小份分装后,高温高压灭菌,室温保存
TAE
组分浓度:储存液50×,使用液1×
配制量:1L
配制方法(储存液50×):
Tris碱(242g);
冰乙酸(57.1 ml);
200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0);
蒸馏水补足1000ml。
TBE
组分浓度:储存液5×,使用液体0.5×
配制量:1L
配制方法(储存液5×):
Tris(54 g);
硼酸(27.5 g);
20 ml的0.5 mol/L的 EDTA (pH 8.0);
蒸馏水补足1000 ml。
PBS磷酸盐缓冲液
组分浓度:0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)
配置量:1L
配制方法:
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中。
用HCl调节溶液的pH值至7.4。
加蒸馏水定容至1L即可。
高压灭菌20min,室温或者4℃冰箱中保存。
蛋白酶K( proteinase K)
组分浓度:20mg/ml
配制量:10ml
配制方法:
将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解,不用涡旋混合。
加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。