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DTT、EDTA怎么配?今天给你分享常用试剂的配制方法

经常有小伙伴留言说:EDTA溶液怎么配?PBS磷酸盐缓冲液怎么配?”今天专门出一期常用试剂的配置方法,觉得有用的可以转发给你的小伙伴们,或自己收藏起来备用哈!


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氨苄青霉素

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组分浓度:100mg/ml 氨苄青霉素

配制量:50ml

配制方法: 

  • 称取5g Ampicillin置于50ml塑料离心管中。

  • 加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。

  • 0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。


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卡那霉素

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组分浓度:50mg/ml卡那霉素

配制量: 50ml

配制方法:

  • 称取2.5g 卡那霉素置于50ml塑料离心管中。

  • 加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。

  • 0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。


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RNase A

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组分浓度:10mg/ml RNase A

配制量:50ml

配制方法:

  • 取0.5g RNase A置于50ml塑料离心管中。

  • 加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。

  • 100℃煮沸15min,缓慢冷却至室温,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。


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IPTG

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组分浓度:24mg/ml IPTG

配制量:50ml

配制方法:    

  • 称取1.2g IPTG置于50ml塑料离心管中。

  • 加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50ml。

  • 用0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。


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X-Gal

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组分浓度:20mg/ml X-Gal

配制量:50ml

配制方法: 

  • 称取1g X-Gal置于50ml塑料离心管中。

  • 加入40mlDMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解之后定容至50ml。

  • 小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。


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DTT

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组分浓度:1M DTT

配制量:10ml

配制方法:   

  • 称取1.54g DTT置于15ml塑料离心管中。

  • 加入8ml的10mM NaAc(pH5.2),充分混合溶解之后定容至10ml。

  • 用0.22μm滤膜过滤除菌,小份分装(1ml一管)后,置于-20℃保存。


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EDTA溶液

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组分浓度:0.5M EDTA

配制量:1L

配制方法: 

  • 称取186.1g Na2EDTA·2H2O置于1L烧杯中。

  • 加入800ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。

  • 用NaOH调节调节pH值至8.0(约20gNaOH),当pH接近8.0时, EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。

  • 小份分装后,高温高压灭菌,室温保存

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TAE

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组分浓度:储存液50×,使用液1×

配制量:1L

配制方法(储存液50×):

  • Tris碱(242g);

  • 冰乙酸(57.1 ml);

  • 200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0);

  • 蒸馏水补足1000ml。


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TBE

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组分浓度:储存液5×,使用液体0.5×

配制量:1L

配制方法(储存液5×):

  • Tris(54 g);

  • 硼酸(27.5 g);

  • 20 ml的0.5 mol/L的 EDTA (pH 8.0);

  • 蒸馏水补足1000 ml。


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PBS磷酸盐缓冲液

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组分浓度:0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)

配置量:1L

配制方法:

  • 称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中。

  • 用HCl调节溶液的pH值至7.4。

  • 加蒸馏水定容至1L即可。

  • 高压灭菌20min,室温或者4℃冰箱中保存。


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蛋白酶K( proteinase K)

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组分浓度:20mg/ml

配制量:10ml

配制方法:  

  • 将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解,不用涡旋混合。

  • 加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。



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