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实验室常用细胞汇总

01

CHO-K1细胞

CHO-K1细胞是实验中非常常用的一个细胞株,在生物制药中使用也非常广泛。该细胞株培养条件简单,贴壁强度适中,比较容易转染,很适合用它来研究一般哺乳动物基因的功能。

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来源:Cricetulus griseus (中国仓鼠) 卵巢 

形态:表皮细胞 

生长特性:贴壁

注释:CHO-K1由CHO衍生而来,CHO是T. T. Puck 在1957年从一只成年中国仓鼠卵巢获得的。

培养液:Ham's F12K (含2 mM L-谷氨酰胺,1.5 g/L NaHCO3), 10% 胎牛血清。

传代:吸去培养液。 用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:4到1:8为宜,传代期间培养液更换1-2次)

冻存:95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。


02

293细胞

293细胞比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株:293T/17的转染效率更高,成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。

293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需要让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里。

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来源:人体肾脏

形态:上皮细胞 

生长特性:贴壁 

注释:该细胞含腺病毒5 DNA 。

培养液: MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠), 10% 马血清(热灭活)。

传代: 吸去培养液。 用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:2到1:4为宜,传代期间培养液2-3天更换1次)

冻存:95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。


03

vero细胞

Vero细胞被成功的用来培养狂犬病疫苗、乙脑疫苗等多种疫苗,在非典期间又为研究冠状病毒做出贡献,在医药研究种广泛应用。

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来源: 非洲绿猴肾细胞 

形态:上皮细胞 

生长特性:贴壁

注释:该细胞是日本千叶大学的Y. Yasumura和Y. Kawakita于1962年3月27日从一只正常的成年非洲绿猴肾组织培养出来的。

培养液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠), 10%胎牛血清

传代:吸去培养液。 用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:3至1:6为宜,传代期间培养液每周更换2-3次)

冻存: 95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。


04

NIH-3T3细胞

NIH-3T3细胞在实验室常用来做转染及基因表达的研究。易感病毒有鼠肉瘤病毒和鼠白血病毒。

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来源: Mus musculus(小家鼠)胚胎 

形态:成纤维细胞样 

生长特性:贴壁

注释:为得到适合转染得细胞株,NIH-3T3细胞至少连续克隆过5次。NIH-3T3细胞容易转染DNA,鼠痘病毒阴性。

培养液:DMEM(含4mM L-谷氨酰胺、4.5g/L葡萄糖、1.5g/L碳酸氢钠),10%小牛血清

传代:吸去培养液。(不要让细胞长满培养器皿,长满80%为宜)用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以3-5x103/cm2为宜,传代期间培养液每周更换2次)

冻存: 95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。


05

PC-12细胞

PC-12细胞是一个常用的神经细胞株。

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来源: Rattus norvegicus (褐家鼠) 肾上腺嗜铬细胞瘤(一种交感神经系统的肿瘤)

形态:多角型细胞 

生长特性:贴壁较松,容易成团

注释:PC-12细胞株来源于一种可移植的鼠嗜铬细胞瘤,该细胞对神经生长因子(NGF)有可逆的神经元显形反应,该细胞不合成肾上腺素。

培养液:Ham's F12K (含2 mM L-谷氨酰胺,1.5 g/L NaHCO3)+15%马血清+2.5% 胎牛血清。

传代:吸去培养液。加入新的培养液,用吸管吹下细胞或用手拍打培养瓶或刮下细胞到培养液中,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:4为宜,传代期间2-3天更换培养液)

冻存:95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。


06

Hela细胞

Hela细胞是在所有细胞株中最著名的。它来源于美国的Helen Lane,她1951年死于子宫颈癌。但源自她的肿瘤的细胞却在世界各地的实验室中得到广泛的使用。

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来源:人宫颈癌 

形态:上皮细胞 

生长特性:贴壁

注释:Hela细胞显角蛋白免疫沉淀染色阳性,包含HPV-18序列,有正常水平的pRB和p53的低水平表达。

培养液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠), 10%胎牛血清

传代:吸去培养液。用0.25%(w/v)Trypsin-0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶活性)。加2-3毫升Trypein-EDTA,放37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:2到1:6为宜,每周传代2-3次)

冻存:95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。


07

 Sf9细胞

Sf9细胞常在Baculovirus(杆状病毒)表达系统中用作宿主细胞,来表达外源蛋白。

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来源:叙利亚仓鼠肾细胞

形态:纤维原细胞 

生长特性:贴壁

注释:这个细胞来自于一只出生一天的新生仓鼠,随后被改造成一个易于作表达的宿主细胞株。

培养液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠)+ 10%胎牛血清

传代:吸去培养液。用0.25%(w/v)Trypsin-0.03 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶活性)。加2-3毫升Trypein-EDTA,放37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:2到1:10为宜,每周传代1-2次)

冻存:95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。


08

HepG2细胞

Hep G2细胞来源于一个15岁白人的肝癌组织。该细胞分泌多种血浆蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等。该细胞能大容量培养,乙肝表面抗原阴性,对G418有抗性,对人生长激素有刺激反应。

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来源:人肝癌细胞 

形态:上皮细胞 

生长特性:贴壁

注释:该细胞表达3-羟基-3-甲基戊二酸辅酶A还原酶和肝甘油三酸脂脂肪酶。该细胞在有百草枯(英文名:gramoxone)的环境下过氧化氢酶mRNA表达增加,ApoA-I mRNA 表达减少。

培养液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠)+ 10%胎牛血清。

传代:吸去培养液。 用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清会抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培养箱内约5分钟,直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液,用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。(以1:4至1:6为宜,传代期间培养液每周更换2次)

冻存: 95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。


当然,还有以下这些!

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说明:以上数据来源于 ATCC


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