· 胎牛血清

· 胰蛋白酶

· PBS

·  青霉素-链霉素溶液（100X）

· 吉姆萨染液

2.将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞每皿分别接种100个细胞于含10ml 37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。

3.置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。

4.当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。

5.加纯甲醇或1:3醋酸/甲醇5ml，固定15分钟。

6.去固定液，加适量Giemsa应用染色液染10～30分钟

7.用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。

8.将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。

克隆形成率=（克隆数/接种细胞数）×100%

9.平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。