缺血再灌注损伤(IRI，Ischaemia Reperfusion Injury)是常见的肾脏损伤模式，其导致的急性肾损伤(AKI，acute kidney injury)是临床较棘手的问题，目前没有特定的治疗药物。更严峻地是，近年流行病学调查显示住院患者AKI发生率高达0.99% ~11.6%，这不得不引起我们的重视。同时，肾移植也存在典型的IRI病变。此外，IRI致肾病模型也常用于评价各类药物的治疗效果。
可见此模型应用十分广泛，值得一学。
因此，小编今天还是想跟大家先聊一聊“肾脏缺血再灌注模型”。
手术简介：整个手术过程比较简单，大致分为以下4步。
(1)术前准备眼科剪、有齿镊、无齿镊、小动物动脉夹、眼睑撑开器、医用缝合线、温热的生理盐水纱布条、固定胶布、麻醉药、棉签、电热毯等。
(2)常规腹腔注射麻醉后腹部备皮，仰卧位固定小鼠，电热毯温度为37-38℃。沿正中线剪开小鼠皮肤和腹膜(开口大约3-4 cm)，用撑开器撑开腹腔，暴露右肾。将温热的盐水纱布贴在腹腔其它脏器上，保持湿润。
(3)随后采用缝合线固定右肾周围结缔组织，留一线头作牵拉使用。牵拉线头，钝性分离肾周筋膜组织，并找到右侧肾蒂。永久性结扎右肾蒂后，将小鼠右肾完全摘除。
(4)同样方法找到左侧肾脏，小心地钝性分离筋膜组织，寻找左侧肾动脉；采用小动物动脉夹夹闭左侧肾动脉，阻断左肾血流，造成缺血损伤。采用温热的盐水纱布覆盖在腹腔开口上，湿润并保护脏器，防止干燥。缺血处理结束后，取下动脉夹，待肾脏血流完全恢复后，常规关腹，碘伏消毒缝合处。
手术要点：
(1)术前准备工作要做足，尽量不要术中再去找器械和耗材。所有手术器械和非一次性耗材均需消毒后才能使用，防止术后腹腔感染。同时，不要使用含滑石粉的手套，防止术后腹腔脏器粘连。
(2)右侧肾蒂需永久性结扎，结扎需牢固，防止渗漏导致的腹腔积液。
(3)夹闭时间的长短显然会影响实验结果，文献中提到的夹闭时间包括45min、50min、1h等等，信息比较杂。有研究根据缺血的时间将肾损伤分为轻度(20分钟)，中度(22分钟)或重度(24分钟)。可见至少在20min时，小鼠肾脏已经出现轻度损伤，不建议通过延长夹闭时间造成更严重的缺血，因为这同时可能造成较高的动物死亡率。小编在此建议大家根据自己的研究，充分做好预实验，确定夹闭时间，建立自己的实验条件。此外，很重要的是，小鼠左肾动脉可能存在一定的变异性，若术中夹闭动脉后肾脏颜色变化不均匀，肯定是夹闭不完全造成的，应仔细检查是否存在额外的左肾供血动脉。
(4)一定要使用温热纱布覆盖小鼠脏器，防治脏器表面干燥，但是纱布也不能有过多盐水，否则会对后期血浆肌酐和BUN的结果造成影响；同时本手术开腹时间较长，且小鼠处在麻醉中，体温降低的现象很明显，建议使用电热毯，温度在37-38℃左右，有条件的课题组可以术中实时监测小鼠肛温。
(5)术中操作需尽量轻柔，防止小鼠出现不必要的损伤，影响实验结果。关腹前，要将其它脏器尽量恢复至其生理位置，检查是否有肠扭转。小鼠腹部皮肤和肌肉较松弛，关腹时针头切勿勾到腹腔脏器，防止将大肠或小肠等一起缝合在皮下。
(6)此手术方法同样适用于大鼠。动物的周龄、性别、种属等会对实验结果造成一定影响，因此小编还是建议大家根据自己的研究，做好预实验，这样后期实验才会顺利。
如何评价动物模型：
(1)采用HE染色或者PAS染色(过碘酸希夫染色)，观察肾小管的组织病理损伤，可采用肾脏组织学评分法。
(2)检测血清尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)浓度，这是评价模型质量及模型肾功能的金指标。不同种属及不同品系对IRI的反应不完全相同，因此建议大家做好预实验，充分评估自己的实验条件。
