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血小板手工计数法

血小板计数,指单位体积血液中所含的血小板数目。血小板是血液中最小的细胞,可保护毛细血管的完整性。


正常范围


(100~300)×10^9/L


临床意义


血小板计数有助于临床上止血和血栓性疾病的诊断和鉴别诊断。


增多:见于原发性血小板增多症、慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、急性大出血、急性溶血、恶性肿瘤、感染、缺氧、创伤、骨折等。


减少:见于以下情况:


血小板生成减少(见于急性白血病和再生障碍性贫血等)


血小板破坏过多(见于原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进等疾病)


血小板消耗增加(见于弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等)。


血小板手工计数法操作步骤:


1、 于清洁试管中加入稀释液0.38ml(草酸铵)


2、 准确吸取毛细血管血20μl,擦去管尖外附着血液,置于血小板稀释液内,立即充分混匀。待完全溶血后再次混匀1min。


3、 取上述均匀的血小板悬液1滴,注入计数池内,静置10~15min,使血小板下沉。


4、 用高倍镜计数中央1个大方格(即400个小格)内血板,乘以0.2×10^9/L即为每升血液内血小板数。


2.png


下图可见最多的是双凹圆盘状的红细胞,两个红色箭头所指的是白细胞,而那些比红细胞小很多,具有折光性的“小点”则是血小板。

3.png

公式解读


①×5:将5个中方格的血小板数换算为1个大方格的血小板数;


②×10:将1个大方格(0.1ul)的血小板数换算为1.0ul中的血小板数;


③×20:血液的稀释倍数;


④×10^6:由1.0ul换算为1L;


所以,5个中方格内数到多少个血小板,该标本的血小板计数就是多少(×10^9/L)。


注意:


1、全部用具和稀释液要特别清洁,显微镜仔细的擦净,无任何斑点玻璃器械清洁光滑,因为显微镜目镜,物镜,计数池和盖片上的尘埃可被误认为血小板。

2、刺血一定要深(3mm)。

3、血小板容易聚焦,在滴入计数池前充分混匀,用力太大会破坏血小板,太小则分布不均匀,因此要掌握适当。

4、一定要等血小板完全下沉后再计数,计数要快和仔细,不要把污染微粒看成血小板。血小板结构与白细胞胞浆相似,在光线及焦距调节恰当时半透明有轻微折光性,边缘与中心结构一致,具有一定的形态。大小相差一般不很悬殊,而污染颗粒的大小不一相差悬殊,无一定形态,当旋转调节器时,有时很黑,有时很亮。


5、EDTA依赖的血小板聚集,对于这种标本,需要采集末梢血或者不抗凝静脉血,再进行手工计数。


6、大血小板/小红细胞干扰,此时直接进行手工计数即可,可无需另外采血。


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